Scroll Top
kanones
ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ
DNA
ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΗ ΠΡΑΚΤΙΚΗ Ι

ΒΑΣΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

  • Η απομόνωση του DNA αποτελεί το πρώτο βασικό βήμα για την μετέπειτα μελέτη του DNA και την γονοτύπηση.
  • Το πρωτόκολλο της παρούσας εργαστηριακής άσκησης είναι απόλυτα προσαρμοσμένο για την πραγματοποίηση του από μαθητές και στο πλαίσιο του σχολικού περιβάλλοντος.
  • Όλα τα υλικά που χρησιμοποιούνται κατά τη διάρκεια της άσκησης είναι πλήρως ασφαλή για χρήση αυτών από μαθητές και στο πλαίσιο του σχολικού περιβάλλοντος.
  • Μέση διάρκεια της εργαστηριακής άσκησης «Απομόνωση DNA» είναι 20 λεπτά.
  • Οι κηδεμόνες των μαθητών που συμμετέχουν στην άσκηση πρέπει να έχουν ενημερωθεί πλήρως για τα βήματα και το σκοπό της εργαστηριακής άσκησης και κατόπιν συγκατάθεσης τους, οι μαθητές λαμβάνουν μέρος στην άσκηση.
  • Υπάρχει η δυνατότητα συμμετοχής στα περαιτέρω βήματα της παρούσας εργαστηριακή άσκηση (εκτός των πρώτων δύο βημάτων) με απομόνωση του DNA μελών της ομάδας BioSTEM.
  • Τονίζεται η σημασία της γενετικής ανάλυσης και οι βιοηθικές προεκτάσεις αυτής.

Προετοιμασία εργαστηριακής άσκησης

  • Ισοτονικό διάλυμα εμπορίου
  • Πλαστικό ποτήρι
  • Πλαστικό κουτάλι
  • Χρονόμετρο
  • Πιπέπες Pasteur/πιπέτες ρυθμιζόμενου όγκου τύπου Gilson
  • Φυγόκεντρος
  • Vortex (στροβιλοαναδευτήρας)
  • Διάλυμα SDS
  • Πρωτεινάση K
  • Ισοπροπανόλη
  • Διάλυμα αιθανόλης 70%

Εργαστηριακή πορεία

  1. Ξύνουμε με την κοίλη πλευρά του πλαστικού κουταλιού την έσω παρειά για ένα λεπτό
  2. Ξεπλένουμε την στοματική κοιλότητα με μικρή ποσότητα ισοτονικού διαλύματος και επιστρέφουμε την ποσότητα του βιολογικού δείγματος στο πλαστικό ποτήρι
  3. Μεταφέρουμε 1,5ml του βιολογικού δείγματος σε αυτοπωματιζόμενο σωληνάριο τύπου Eppendorf
  4. Φυγοκέντρηση για 3min
  5. Απόχυση του υπερκειμένου και παραμονή του ιζήματος
  6. Προσθήκη 700μL διαλύματος SDS
  7. Vortex μέχρι τη θραύση των κυττάρων
  8. Προσθήκη 20μL διαλύματος πρωτεΐνάσης Κ
  9. Προσθήκη 700μL ισοπροπανόλης
  10. Φυγοκέντρηση για 2min
  11. Απόρριψη του υπερκειμένου και πραμονή του ιζήματος
  12. Προσθήκη 700μL διαλύματος αιθανόλης 70%
  13. Φυγοκέντρηση για 2min
  14. Διάλυση του DNA σε 100μL H2O

Ερωτήσεις

  • Τι είναι το ίζημα στο τέλος του βήματος 5 της εργαστηριακή άσκησης;
  • Τι είναι το ίζημα στο τέλος του βήματος 11 της εργαστηριακή άσκησης;
  • Με το πέρας του βήματος 14, διακρίνεις ακόμη κάποιο ίζημα;
Skip to content